ravo SOX1-Blot
Rekombinanter Immunoblot zum Nachweis von Autoantikörpern gegen SOX1 als Marker für ein kleinzelliges Bronchialkarzinom bei Patienten mit Lambert-Eaton Myasthenischem Syndrom (LEMS).
In bis zu 50 % der Patienten mit Lambert-Eaton Myasthenischem Syndrom (LEMS) findet sich ein Tumor, vorwiegend ein kleinzelliges Bronchialkarzinom (SCLC). Vor kurzem konnte gezeigt werden, daß bei 43% der Patienten mit LEMS und SCLC die gefundenen Autoantikörper (AGNA = anti-glial nuclear antibody) gegen SOX1 gerichtet sind. SOX1 ist ein Protein, das bei der Entwicklung des Nervensystems eine Rolle spielt und in kleinzelligen Bronchialkarzinomen exprimiert wird (L. Sabater et al., Neurology, 2008; 70: 924-928).In Einzelfällen wurde auch über den Nachweis von Autoantikörpern gegen SOX1 bei Patienten mit paraneoplastischer limbischer Encephalitis berichtet.
Im Unterschied zu den klassischen paraneoplastischen Autoantikörpern
(siehe ravo PNS Blot) finden sich für SOX1 häufiger schwache Autoantikörper-Titer, deren Bedeutung derzeit nicht geklärt ist.
Kurze Beschreibung der Testdurchführung:
- Die Patientenseren 1 : 10 in gebrauchsfertigem Probenpuffer
vorverdünnen (10 µl Serum plus 90 µl Puffer).
- Einen Streifen mit der gebrauchsfertigen positiven Kontrolle versehen.
- Die übrigen Streifen mit 2 ml gebrauchsfertigen Probenpuffer
überschichten und jeweils 10 µl vorverdünntes Patientenserum
zugeben (Endverdünnung 1 : 2.000). Vorsichtig mischen.
- 60 Minuten bei Raumtemperatur auf einem Schüttler inkubieren.
- 5 mal Waschen mit gebrauchsfertigem Waschpuffer.
- Pro Streifen 2 ml des gebrauchsfertigen Alkalische Phosphatase
markierten anti-Human-IgG Konjugates pipettieren.
- 30 Minuten bei Raumtemperatur auf einem Schüttler inkubieren.
- 5 mal Waschen mit gebrauchsfertigem Waschpuffer.
- Pro Streifen 2 ml des gebrauchsfertigen Substrates (BCIP/NBT)
pipettieren.
- 25 Minuten bei Raumtemperatur auf einem Schüttler inkubieren.
- Die Reaktion durch Spülen mit Aqua dest. stoppen.
Die Streifen auf sauberem Filterpapier trocknen und auswerten.
Die Streifen lichtgeschützt aufbewahren.